细胞实验

细胞生物学平台

1．划痕实验

细胞划痕实验是简洁测定细胞迁移运动与修复能力的方法，类似于体外伤口愈合模型，在体外培养皿或平板培养的单层贴壁细胞上，用微量枪头或者其他硬物在细胞生长的*区域划线，去除*部分的细胞，然后再继续培养细胞至实验设定时间，然后取出细胞培养板，观察周边细胞是否生长（修复）至*划痕区，以判断细胞的生长迁移能力。

2．粘附实验

细胞黏附性是维持组织结构稳定的基本条件，也是细胞运动和发挥功能的调节因素，并且对细胞的增殖、分化有重要影响。通常可分为两类，即细胞与细胞黏附和细胞与基质黏附。机体内许多细胞，如上皮细胞，需要牢靠地固定在某处发挥功能；另一些细胞，如白细胞，活跃运动，就需要不断调节细胞黏附。细胞黏附性的改变在**转移过程中也发挥着重要作用。体外测定细胞粘附性实验方法的建立，为粘附分子的发现、细胞间粘附影响的研究提供了较为有效的方法。

3．流式细胞术

流式细胞仪是应用流式细胞术建立起来的仪器装置。它使细胞或微粒在液流中流动,逐个通过入射光束,并用高灵敏度检测器记录下散射光及各种荧光信号,从而得以对粒子进行多参数分析,包括诸如粒子形状和大小、 细胞周期、 细胞内细胞因子、 细菌表面抗原、细胞DNA内含物等。FCM检测的粒子一般为活性细胞,通过激光光源激发细胞上所标记的荧光物质的强度和颜色以及散射光的强度可以得到细胞内部各种各样的生物信息。另外FCM还可进行细胞分选,可以根据所检测细胞的某种性质进行分选,并且如果分选的过程是在无菌条件下进行的,这些细胞还可以用来培养。

4．血管形成实验

血管形成体外模型可分为细胞水平的增殖实验、迁移实验和管腔形成实验，以及器官水平的人胎盘血管段培养模型和大鼠动脉环模型。目前通常所说的血管形成实验是指管腔形成实验。管腔形成反映毛细血管的早期过程，是体外检查内皮细胞功能完整的指标。

 

5．双荧光素酶实验

实验应用：

 潜在启动子/启动子核心区域检测；

 潜在增强子/抑制子等调控子核心元件检测；

 启动子区可能的转录因子结合位点检测；

 启动子/增强子与转录因子的相互作用；

 病毒/细胞相互作用；

 药物等化学诱导因素对启动子活性的调节（抑制或增强）；

 射线等物理诱导因素对启动子活性的调节（抑制或增强）；

 microRNA靶基因验证。

6．稳转细胞系的构建

稳定转染就是将外源基因DNA整合到宿主细胞染色体上，使宿主细胞可长期表达目的基因及蛋白。需要在瞬时转染基础上对靶细胞进行筛选或者应用高转染效率的病毒，根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物进行细胞传代，从而得到可稳定表达目的基因的细胞系。

 

7．细胞克隆形成实验

克隆形成实验是**细胞学研究中的一种常用技术，其原理是将细胞分离成单细胞悬液，在培养基上接种培养，根据集落形成数量和大小来检测细胞增殖能力和致瘤性。该实验可用来研究**细胞的增殖能力、侵袭性，探讨细胞对不同杀伤因素的敏感性。

8．Transwell侵袭实验

细胞体外侵袭实验主要应用于**细胞侵袭和转移能力研究。该实验经常使用transwell plate通过matrigel穿膜侵袭实验来检测**细胞的侵袭潜能

9．Transwell迁移实验

Transwell迁移实验常用8.0、12.0 μm膜，上室种**细胞，下室加入FBS或某些特定的趋化因子，**细胞会向营养成分高的下室跑，计数进入下室的细胞量可反映**细胞的迁移能力。

10. 细胞增殖及活性检测

检测细胞存活与增殖的方法主要包括观察DNA合成含量和检测细胞代谢活性两种，前者主要有Brdu、EDU检测等，后者主要有MTT、CCK8等检测，客户可根据处理药物数量等因素选择合适的检测方法。

11．原代细胞制备与培养

结果展示

大鼠肝星状细胞及α-SMA*荧光鉴定

大鼠骨髓来源内皮祖细胞以及Dil-Ac-LDL+ FITC-lectin双标鉴定

大鼠肝枯否细胞以及F4/80单标鉴定

服务提示

1. 根据客户需求分离特定的原代细胞。

2. 麻烦请告知是否需进行鉴定，亿鸣复兴生物根据不同细胞的特性，可提供*荧光，*组化，特殊染色（油红O染色、PAS糖原染色等）、扫描电镜、摄取实验、血管形成实验等不同的鉴定方法。